凱氏定氮法的優缺點及注意事項

　　一、凱氏定氮法的優缺點

　　優點：

　　1、可用於所有食品的蛋白質分析中。

　　2、操作相對比較簡單。

　　3、實驗費用較低。

　　4、結果準確，是一種測定蛋白質的經典方法。

　　5、用微量凱氏定氮法可測定樣品中微量的蛋白質。

　　缺點：

　　1、最終測定的是總有機氮，而不只是蛋白質氮。

　　2、實驗時間太長，至少需要2小時才能完成。

　　3、精度差，精度低於雙縮脲法。

　　二、凱氏定氮法注意事項

　　1、樣品應是均勻的，固體樣品應預先研細混勻，液體樣品應振搖或攪拌均勻。

　　2、樣品放入定氮瓶內時，不要沾附頸上，萬一沾附可用少量水衝下，以免被檢樣消化不完全,結果偏低。

　　3、硝化時如不容易呈透明溶液，可將定氮瓶放冷後，慢慢加入百分之三十過氧化氫2到3毫升，促使氧化。

　　4、在整個消化過程中，不要用強火。保持和緩的沸騰，使火力集中在凱氏瓶底部，以免附在壁上的蛋白質在無硫酸存在的情況下,使氮有損失。

　　凱氏定氮法是測定化合物或混合物中總氮量的一種方法。即在有催化劑的條件下，用濃硫酸消化樣品將有機氮都轉變成無機銨鹽，然後在鹼性條件下將銨鹽轉化為氨，隨水蒸氣蒸餾出來併為過量的硼酸液吸收，再以標準鹽酸滴定，就可計算出樣品中的氮量。由於蛋白質含氮量比較恆定，可由其氮量計算蛋白質含量，故此法是經典的蛋白質定量方法。蛋白質是含氮的有機化合物。蛋白質與硫酸和催化劑一同加熱消化，使蛋白質分解，分解的氨與硫酸結合生成硫酸銨。然後鹼化蒸餾使氨遊離，用硼酸吸收後再以硫酸或鹽酸標準溶液滴定，根據酸的消耗量乘以換算係數，並

　　因為氮素在樣品中多以有機化合物的形式存在，不能直接測試。所以需要將樣品與硫酸和催化劑一同加熱消化，使有機氮變成無機氮而生成氨，分解的氨與硫酸結合生成硫酸銨。然後鹼化蒸餾使氨（鹼性）遊離，用硼酸吸收後再用硫酸或鹽酸標準溶液滴定，根據酸的消耗量來計算氮的含量，也就是說為了根據酸鹼中和反應來計算氮素的含量，需要將樣品中的氮變為鹼性的氨才可以反應，如果要計算蛋白的含量，只需要乘以蛋白的換算係數即可。