動物脾臟有上百萬種不同的B淋巴細胞系，具有不同基因的B淋巴細胞合成不同的抗體。當機體受抗原刺激時，抗原分子上的許多決定簇分別啟用各個具有不同基因的B細胞。被啟用的B細胞分裂增殖形成效應B細胞（漿細胞）和記憶B細胞，大量的漿細胞克隆合成和分泌大量的抗體分子分佈到血液、體液中。如果能選出一個製造一種專一抗體的漿細胞進行培養，就可得到由單細胞經分裂增殖而形成細胞群，即單克隆。單克隆細胞將合成針對一種抗原決定簇的抗體，稱為單克隆抗體。
動物脾臟有上百萬種不同的B淋巴細胞系，具有不同基因的B淋巴細胞合成不同的抗體。當機體受抗原刺激時，抗原分子上的許多決定簇分別啟用各個具有不同基因的B細胞。被啟用的B細胞分裂增殖形成效應B細胞（漿細胞）和記憶B細胞，大量的漿細胞克隆合成和分泌大量的抗體分子分佈到血液、體液中。如果能選出一個製造一種專一抗體的漿細胞進行培養，就可得到由單細胞經分裂增殖而形成細胞群，即單克隆。單克隆細胞將合成針對一種抗原決定簇的抗體，稱為單克隆抗體。
單克隆抗體的製備原理：
1、要製備單克隆抗體需先獲得能合成專一性抗體的單克隆B淋巴細胞，但這種B淋巴細胞不能在體外生長；
2、實驗發現骨髓瘤細胞可在體外生長繁殖，應用細胞雜交技術使骨髓瘤細胞與免疫的淋巴細胞二者合二為一，得到雜種的骨髓瘤細胞；
3、雜種骨髓瘤細胞繼承兩種親代細胞的特性，它既具有B淋巴細胞合成專一抗體的特性，也有骨髓瘤細胞能在體外培養增殖永存的特性，用這種來源於單個融合細胞培養增殖的細胞群，可製備抗一種抗原決定簇的特異單克隆抗體。
1、免疫動物
免疫動物是用目的抗原免疫小鼠，使小鼠產生致敏B淋巴細胞的過程；
2、細胞融合
採用眼球摘除放血法處死小鼠，無菌操作取出脾臟，在平皿內擠壓研磨，製備脾細胞懸液。 將準備好的同系骨髓瘤細胞與小鼠脾細胞按一定比例混合，並加入促融合劑聚乙二醇。在聚乙二醇作用下，各種淋巴細胞可與骨髓瘤細胞發生融合，形成雜交瘤細胞；
3、選擇性培養
選擇性培養的目的是篩選融合的雜交瘤細胞，一般採用HAT選擇性培養基；
4、雜交瘤陽性克隆的篩選與克隆化
採用靈敏、快速、特異的免疫學方法，篩選出能產生所需單克隆抗體的陽性雜交瘤細胞，並進行克隆擴增；
5、單克隆抗體的大量製備
單克隆抗體的大量製備一般採用動物體內誘生法和體外培養法。