瓊脂糖凝膠電泳原理

　　1、瓊脂糖凝膠電泳原理：瓊脂糖凝膠具絡，物質分子透過時到阻力，大分子物質在湧動時受到的阻力大，因此在凝膠電泳中，帶電顆粒的分離不僅取決於淨電荷的性質和數量，而且還取決於分子大小，這就大大提高了分辨能力。但由於其孔徑相比於蛋白質太大，對大多數蛋白質來說其分子篩效應微不足道，現廣泛應用於核酸的研究中。瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂糖作支援介質的一種電泳方法。其分析原理與其他支援物電泳最主要區別是：它兼有“分子篩”和“電泳”的雙重作用。

　　2、核酸是兩性電解質，其等電點為pH2-2.5，在常規的電泳緩衝液中（pH約8.5），核酸分子帶負電荷，在電場中向正極移動。核酸分子在瓊脂糖凝膠中泳動時，具有電荷效應和分子篩效應，但主要為分子篩效應。線狀雙鏈DNA分子在一定濃度瓊脂糖凝膠中的遷移速率與DNA分子量對數成反比，分子越大則所受阻力越大，也越難於在凝膠孔隙中移動，因而遷移得越慢。

　　1、瓊脂糖凝膠電泳原理：瓊脂糖凝膠具絡，物質分子透過時到阻力，大分子物質在湧動時受到的阻力大，因此在凝膠電泳中，帶電顆粒的分離不僅取決於淨電荷的性質和數量，而且還取決於分子大小，這就大大提高了分辨能力。但由於其孔徑相比於蛋白質太大，對大多數蛋白質來說其分子篩效應微不足道，現廣泛應用於核酸的研究中。瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂糖作支援介質的一種電泳方法。其分析原理與其他支援物電泳最主要區別是：它兼有“分子篩”和“電泳”的雙重作用。

　　2、核酸是兩性電解質，其等電點為pH2-2.5，在常規的電泳緩衝液中（pH約8.5），核酸分子帶負電荷，在電場中向正極移動。核酸分子在瓊脂糖凝膠中泳動時，具有電荷效應和分子篩效應，但主要為分子篩效應。線狀雙鏈DNA分子在一定濃度瓊脂糖凝膠中的遷移速率與DNA分子量對數成反比，分子越大則所受阻力越大，也越難於在凝膠孔隙中移動，因而遷移得越慢。

　　瓊脂糖凝膠電泳回收核酸的常用方法：

　　常規瓊脂糖電泳後，在目的條帶前方挖槽，灌入低熔點瓊脂糖，凝膠後再電泳一小會兒，等條帶進入低熔點瓊脂糖區域再將瓊脂糖切出來，就可以非常節約了。

　　除了直接酚抽低熔點瓊脂糖凝膠，還有人用瓊脂糖酶來消化瓊脂糖凝膠，條件也相當溫和，但瓊脂糖酶價格並不便宜（酶的成本至少5-6塊），多數的酶只適合用低熔點瓊脂糖，費時間還特長，所以並不是得特別好用。

　　T家的瓊脂糖酶可以用於常規瓊脂糖，前提是你有辦法在65度把那膠化了，但那需要極好的耐心。