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蛋白質檢測方法有哪些

蛋白質檢測方法有哪些

  蛋白質檢測方法:

  1,微量凱氏(kjeldahl)定氮法

  樣品與濃硫酸共熱。含氮有機物即分解產生氨(消化),氨又與硫酸作用,變成硫酸氨。經強鹼鹼化使之分解放出氨,借蒸汽將氨蒸至酸液中,根據此酸液被中和的程度可計算得樣品之氮含量。

  2,雙縮脲法(biuret法)

  3,folin―酚試劑法(lowry法)

檢測蛋白質的方法有哪些

  1、凱氏定氮法

  凱氏定氮法是測定化合物或混合物中總氮量的一種方法。即在有催化劑的條件下,用濃硫酸消化樣品將有機氮都轉變成無機銨鹽,然後在鹼性條件下將銨鹽轉化為氨,隨水蒸氣蒸餾出來併為過量的硼酸液吸收,再以標準鹽酸滴定,就可計算出樣品中的氮量。

  由於蛋白質含氮量比較恆定,可由其氮量計算蛋白質含量,故此法是經典的蛋白質定量方法。

  2、雙縮脲法

  雙縮脲法是一個用於鑑定蛋白質的分析方法。雙縮脲試劑是一個鹼性的含銅試液,呈藍色,由1%氫氧化鉀、幾滴1%硫酸銅和酒石酸鉀鈉配製。

  當底物中含有肽鍵時(多肽),試液中的銅與多肽配位,配合物呈紫色。可透過比色法分析濃度,在紫外可見光譜中的波長為540nm。鑑定反應的靈敏度為5-160mg/ml。鑑定反應蛋白質單位1-10mg。

  3、酚試劑法

  取6支試管分別標號,前5支試管分別加入不同濃度的標準蛋白溶液,最後一支試管加待測蛋白質溶液,不加標準蛋白溶液,在室溫下放置30分鐘,以未加蛋白質溶液的第一支試管作為空白對照,於650nm波長處測定各管中溶液的吸光度值。

  4、紫外吸收法

  大多數蛋白質在280nm波長處有特徵的最大吸收,這是由於蛋白質中有酪氨酸,色氨酸和苯丙氨酸存在,可用於測定0.1~0.5mg/mL含量的蛋白質溶液。

  取9支試管分別標號,前8支試管分別加入不同濃度的標準蛋白溶液,1號試管不加標準蛋白溶液,最後一支試管加待測蛋白質溶液,而不加標準蛋白溶液,每支試管液體總量透過加入蒸餾水補足而保持一致,將液體混合均勻,在280nm波長處進行比色,記錄吸光度值。

  5、考馬斯亮藍法

  考馬斯亮藍顯色法的基本原理是根據蛋白質可與考馬斯亮藍G-250 定量結合。當考馬斯亮藍 G-250 與蛋白質結合後,其對可見光的最大吸收峰從 465nm 變為 595nm。

  在考馬斯亮藍 G-250 過量且濃度恆定的情況下,當溶液中的蛋白質濃度不同時,就會有不同量的考馬斯亮藍 G-250 從吸收峰為 465nm 的形式轉變成吸收峰為 595nm 的形式,而且這種轉變有一定的數量關係。

  一般情況,當溶液中的蛋白質濃度增加時,顯色液在 595nm 處的吸光度基本能保持線性增加,因此可以用考馬斯亮藍 G-250 顯色法來測定溶液中蛋白質的含量。

空氣流量計檢測方法有哪些

  空氣流量計檢測方法:1、可以透過測量發動機執行時的輸出電壓資料來判斷。2、可以透過測量感測器輸出電壓來判斷。3、在發動機運轉時,拔下空氣流量計插頭,透過觀察發動機變化情況來判斷。

  1、可以透過測量發動機執行時的輸出電壓資料來判斷:在插頭信的號端動態訊號電壓,發動機怠速情況下,標準電壓為0.8-1.4V;加速到全負荷時,電壓訊號可接近4V。如果不在該範圍,可能是空氣流量感測器本身損壞,也可能是髒汙所致,清洗即可。

  2、可以透過測量感測器輸出電壓來判斷:用萬能表檢測,一般電壓值為5V,用吹風機向感測器內吹風,如果電壓隨入風量的大小變化而變化,則為正常;如果不變或變化小,則表明流量計故障,需要更換。

  3、在發動機運轉時,拔下空氣流量計插頭,透過觀察發動機變化情況來判斷:

  故障現象稍有變化:說明空氣流量計是好的;

  故障消失:說明流量計訊號有偏差,並沒有損壞;

  故障依舊:說明此空氣流量計早已損壞或線路不良。


甲醛檢測方法哪些

  1、分光光度法:分光光度法包括乙醯丙酮法、酚試劑法、AHMT法、品紅一亞硫酸法、變色酸法、間苯三酚法、亞硝基亞鐵氰化鈉法和氯化鐵法這8種   2、電化學檢測法:電化學法包括示波極譜測定法和電位法者兩種   3、色譜法:色譜法包括氣相色譜法和液相色譜法這兩種。   4、感測器法:用於檢測甲醛的感測器有電化學 ...

成骨細胞增殖分化的檢測方法哪些

  成骨細胞增殖分化的檢測方法有鹼性磷酸酶(AP)活性檢測,骨鈣素的檢測,骨保護素(OPG)mRNA表達等等,成骨細胞主要由內外骨膜和骨髓中基質內的間充質始祖細胞分化而來。   骨細胞是在成骨細胞系譜中成熟和終極的分化細胞。骨細胞包埋於礦化骨組織中,淺表骨細胞仍然保留部分成骨細胞結構。隊形細胞是排列於成體大部 ...

混凝土強度檢測方法哪些

  混凝土是建築工程的最主要材料,混凝土強度決定建築工程質量基礎。檢測混凝土強度的方法有很多,比較常用的有回彈法、超聲回彈法、鑽芯法、拔出法、超聲法等。   混凝土(砼,石矢)是由凝膠材料、骨料和水按適當比例配置,再經過一定時間硬化而成的複合材料的統稱,是世界上使用量最大的人工土木建築材料。   混凝土的硬度 ...

去除核酸中蛋白質方法哪些

  凝膠過濾:利用凝膠對不同組成成分,因分子大小不同而阻滯作用不同的差異,將核酸阻滯,過濾蛋白質。超濾:以壓力為推動力的膜分離技術,適用於蛋白質分子和核酸分子大小差別較大時 。蛋白酶分解:蛋白酶分解蛋白質保留核算。超聲降解:超聲降解蛋白質保留核算。氯仿抽提:抽提後離心,使抽提物分三層,下層為脂溶性雜質,中間層 ...

基因多型性的主要檢測方法哪些

  基因多型性的主要檢測方法主要有以下兩種:   1.限制性片段長度多型性:由DNA 的多型性,致使DNA 分子的限制酶切位點及數目發生改變,用限制酶切割基因組時,所產生的片段數目和每個片段的長度就不同,即所謂的限制性片段長度多型性,導致限制片段長度發生改變的酶切位點,又稱為多型性位點。現在多采用PCR-RF ...

甲醛檢測治理方法哪些

  1、通風法:這是一種最簡單的方式,就是把窗戶和大門開啟,讓空氣進入流通的狀態,這樣就可以把有毒物質排出去了,不過它的速度是比較慢的,少的話需要通3年的時間,多的話長達15年,所以要結合具體的情況進行考慮。   2、甲醛清除劑:可以直接去購買清除劑,然後把它噴灑在屋子裡面,這樣就能夠起到消融的作用了,不過要 ...

蛋白質結構分析方法哪些

  蛋白質結構分析方法有:X射線晶體衍射分析和核磁共振。x射線衍射法的解析度可達到原子的水平,可清楚的描述配體存在與否對蛋白質的影響;多維核磁共振波譜技術已成為確定蛋白質和核酸等生物分子溶液三維結構的唯一有效手段。   蛋白質是組成人體一切細胞、組織的重要成分。機體所有重要的組成部分都需要有蛋白質的參與。一般 ...