1、高效液相色譜法的原理是以液體為流動相，採用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩衝液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離後，進入檢測器進行檢測。
2、高效液相色譜法有“四高一廣”的特點：
（1）高壓：流動相為液體，流經色譜柱時，受到的阻力較大，為了能迅速透過色譜柱，必須對載液加高壓。
（2）高速：分析速度快、載液流速快，較經典液體色譜法速度快得多，通常分析一個樣品在15～30分鐘，有些樣品甚至在5分鐘內即可完成，一般小於1小時。
（3）高效：分離效能高。可選擇固定相和流動相以達到最佳分離效果，比工業精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。
（4）高靈敏度：紫外檢測器可達0。01ng，進樣量在μL數量級。
（5）應用範圍廣：百分之七十以上的有機化合物可用高效液相色譜分析，特別是高沸點、大分子、強極性、熱穩定性差化合物的分離分析，顯示出優勢。
因為在你的檢測波長中有負吸收的物質，所以會出倒峰，用水做溶劑是會有倒峰，多用有機相洗柱子再看看。
1：你用的溶劑出峰了，但保留時間一般很小2：你的色譜系統個元器件之間的資料線正負極接反。
在反相液相色譜中，固定相的極性小於流動相，洗脫順序取決於溶質分子的疏水性，疏水性強的保留時間長。
反相高效液相色譜是由非極性固定相和極性流動相所組成的液相色譜體系，它正好與由極性固定相和弱極性流動相所組成的液相色譜體系相反。RP-HPLC的典型的固定相是十八烷基鍵合矽膠，典型的流動相是甲醇和乙腈。RP-HPLC是當今液相色譜的最主要的分離模式，幾乎可用於所有能溶於極性或弱極性溶劑中的有機物的分離。 反相色譜法適於分離非極性、極性或離子型化合物，大部分的分析任務皆由反相色譜法完成。
正相色譜法：根據流動相和固定相相對極性不同，液相色譜分為正相色譜和反相色譜。固定相極性大於流動相極性的情況，稱為正相色譜。矽膠色譜和極性鍵合相色譜可作正相色譜。
正相色譜是採用極性固定相、非極性流動相的分離方法。這是一種根據分子的極性大小將其分開的液相色譜技術，因為正相色譜以吸附效應作為分離的基礎，所 ...
1、氣相色譜儀原理：利用色譜柱先將混合物分離，然後利用檢測器依次檢測已分離出來的組分。
應用範圍：
環境保護： 大氣水源等汙染地的痕量毒物分析、監測和研究。
生物化學： 臨床應用，病理和毒理研究。
食品發酵： 微生物飲料中微量組分的分析研究。
中西藥物： 原料中間體及成品分析。
2 ...
荷蘭學者範第姆特等人吸收塔板理論中的一些概念，並進一步把色譜分配過程與分子擴散和氣液兩相中的傳質過程聯絡起來，建立了色譜過程的動力學理論，即速率理論。速率理論認為，單個組分分子在色譜柱內固定相和流動相間要發生千萬次轉移，加上分子擴散和運動途徑等因素，它在柱內的運動是高度不規則的，是隨機的，在柱中隨流動相前 ...
高效液相色譜更適宜於分離、分析高沸點、熱穩定性差、有生理活性及相對分子量比較大的物質,因而廣泛應用於核酸、肽類、內酯、稠環芳烴、高聚物、藥物、人體代謝產物、表面活性劑,抗氧化劑、殺蟲劑、除莠劑的分析等物質的分析. ...
離子色譜的工作原理：離子交換平衡離子色譜中使用的固定相是離子交換樹脂，離子交換樹脂上分佈有固定的帶電荷的基團和能遊動的配位離子。當樣品加入離子交換色譜往後，如果用適當的溶液洗脫，樣品離子即與樹脂上能遊動的離子進行交 換，並且連續進行可逆交換吸附和解吸，最後達到吸附平衡。
離子色譜法是利用離子交換原理， ...
原理：離子交換色譜以離子交換樹脂作為固定相，樹脂上具有固定離子基團及可交換的離子基團。當流動相帶著組分電離生成的離子透過固定相時，組分離子與樹脂上可交換的離子基團進行可逆變換。根據組分離子對樹脂親合力不同而得到分離。
應用： 離子色譜主要用於測定各種離子的含量，特別適於測定水溶液中低濃度的陰離子，例如 ...
分為三類：柱色譜、紙色譜以及薄層色譜
1、柱色譜為向玻璃管中填入固定相，以流動相溶劑浸潤後在上方倒入待分離的溶液，再滴加流動相，因為待分離物質對固定相的吸附力不同，吸附力大的固著不動或移動緩慢，吸附力小的被流動相溶劑洗下來隨流動相向下流動，從而實現分離；
2、紙色譜以濾紙條為固定相，在紙條上點上待 ...