PCR聚合酶鏈式反應只需要一種叫TaqDNA聚合酶的酶即可。
TaqDNA聚合酶是利用DNA在體外攝氏95攝氏度高溫時變性會變成單鏈,低溫時引物與單鏈按鹼基互補配對的原則結合,再調溫度至DNA聚合酶最適反應溫度即72攝氏度左右,TaqDNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖的方向合成互補鏈。基於TaqDNA聚合酶製造的PCR儀實際就是一個溫控裝置,能在變性溫度,復性溫度,延伸溫度之間很好地進行控制。
PCR聚合酶鏈式反應只需要一種叫TaqDNA聚合酶的酶即可。
TaqDNA聚合酶是利用DNA在體外攝氏95攝氏度高溫時變性會變成單鏈,低溫時引物與單鏈按鹼基互補配對的原則結合,再調溫度至DNA聚合酶最適反應溫度即72攝氏度左右,TaqDNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖的方向合成互補鏈。基於TaqDNA聚合酶製造的PCR儀實際就是一個溫控裝置,能在變性溫度,復性溫度,延伸溫度之間很好地進行控制。
普通PCR需要正反向引物各一條,即一對引物,有些特殊PCR需要多條引物。
pcr技術的基本原理類似於dna的自然複製過程,其特異性依賴於靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。
pcr是一種體外dna擴增技術,它依賴於dna聚合酶在模板dna、引物和四種脫氧核苷酸存在下的酶促反應。待擴增的DNA片段及其兩側互補的寡核苷酸鏈引物透過“高溫變性-低溫退火-引物延伸”三步反覆迴圈,使DNA片段的數量成倍增加,因此在短時間內,我們需要大量的特異性基因片段。
在環境檢測中,靶核酸序列經常存在於細胞提取物等複雜混合物中,且含量非常低。對於檢測這種複雜群體中的特定微生物或基因,雜交是不敏感的。
pcr技術可以將目標序列擴增幾個數量級,然後用探針雜交檢測擴增序列,用於微生物種群結構的定性或定量分析。pcr技術常與rt-pcr、競爭pcr、巢式pcr、rapd、ardra等技術結合使用。
婦科的熒光定量檢查,它主要是用於支原體衣原體感染的一個檢查,它主要是透過PCR原理來檢測,是否有過多的支原體衣原體出現感染。常常需要用專門的藥敏試驗來確診敏感藥物,然後再選擇敏感藥物對症治療。如果女性朋友對相應的藥物敏感,可以選擇相應的進行口服。
實時熒光定量PCR技術於1996年由美國AppliedBiosystems公司推出,由於該技術不僅實現了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規PCR相比,它具有特異性更強、有效解決PCR汙染問題、自動化程度高等特點。