脫色時間的掌握,是革蘭染色成敗的關鍵。革蘭染色法,由丹麥病理學家ChristainGram於1884年創立,是細菌學中很重要的鑑別染色法,因為透過此法染色,可將細菌鑑別為革蘭陽性菌(G+)和革蘭陰性菌(G-)兩大類。
細菌(學名:Bacteria)是指生物的主要類群之一,屬於細菌域。也是所有生物中數量最多的一類,據估計,其總數約有5×10^30個。細菌的形狀相當多樣,主要有球狀、桿狀,以及螺旋狀。
革蘭染色成敗的關鍵在於脫色時間。革蘭氏染色四大基本步驟:結晶紫初染、碘液媒染、乙醇脫色、沙黃復染,其中乙醇脫色是關鍵。因為如果脫色過度,有可能會使革蘭氏陽性菌呈假陰性,如果脫色不夠,有可能使革蘭氏陰性菌呈假陽性。
革蘭氏染色是細菌學中廣泛使用的一種鑑別染色法,透過結晶紫初染和碘液媒染後,在細胞壁內形成了不溶於水的結晶紫與碘的複合物,革蘭氏陽性菌由於其細胞壁較厚、肽聚糖網層次較多且交聯緻密,革蘭氏染色屬復染法,即將標本固定後,先用龍膽紫染色,加碘液媒染後用酒精脫色,再用蕃紅復染
因為用了伊紅美藍培養基
當大腸桿菌分解乳糖產酸時細菌帶正電荷被染成紅色,再與美藍結合形成紫黑色菌落,並帶有綠色金屬光澤。而產氣桿菌則形成呈棕色的大菌落。
在鹼性環境中不分解乳糖產酸的細菌不著色,伊紅和美藍不能結合,故沙門氏菌等為無色或琥珀色半透明菌落。金葡菌在此培養基上不生長。
1、塗片固定。
2、草酸銨結晶紫染1分鐘。
3、蒸餾水沖洗。
4、加碘液覆蓋塗面染約1分鐘。
5、水洗,用吸水紙吸去水分。
6、加95%酒精數滴,並輕輕搖動進行脫色,20秒後水洗,吸去水分。
7、蕃紅染色液(稀)染1分鐘後,蒸餾水沖洗。乾燥,鏡檢。 ...
革蘭氏染色法的原理是革蘭氏陽性菌和陰性菌在化學和生理性質上差別比較大,染色體的反應也不一樣,一般陽性菌和碘和結晶紫的複合物結合比較牢固,不容易脫色,而陰性菌的結合相對比較弱,容易脫色,這是導致染色反應的主要依據。
細菌經過鹼性燃料結晶紫染色,後經過碘液進行媒染,然後用酒精脫色,在一定的條件下,有的細菌 ...
細菌革蘭染色的機理是細菌經過鹼性燃料結晶紫染色,後經過碘液進行媒染,然後用酒精脫色,不被脫色的被稱為革蘭氏陽性菌,脫去的則被稱之為革蘭氏陰性菌。脫色後可以在用紅色染料進行復染,陽性菌是紫色,陰性菌則被重新染上了紅色。很多有芽孢的桿菌和大部分的球菌,還有放射菌以及真菌杜輝呈現革蘭氏正反應,而弧菌、螺旋體以及 ...
細菌一般可分為革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌,透過革蘭氏染色使細菌呈現不同的顏色以達到鑑別菌種的目的。
革蘭氏染色的關鍵在於嚴格掌握酒精脫色程度。革蘭氏陰性菌將呈現紅色,革蘭氏陽性菌將呈現紫紅色,如脫色過度,則陽性菌可被誤染為陰性菌;而脫色不夠時,陰性菌可被誤染為陽性菌。此外,菌齡也影響染色結果,如陽性菌 ...
酒精脫色為整個流程最關鍵的一步。
革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟。
革蘭氏染色法,是指細菌學中廣泛使用的一種重要的鑑別染色法,屬於復染法。這種染色法是由丹麥醫生革蘭於1884年所發明,最初是用來鑑別肺炎球菌與克雷伯肺炎菌。革蘭染色法一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟。未 ...
1、選用活躍生長期菌種染色,老齡的革蘭氏陽性細菌會被染成紅色而造成假陰性。
2、塗片不宜太過厚,以免脫色不完全造成假陽性。
3、脫色是革蘭氏染色是否成功的關鍵,脫色不夠造成假陽性,脫色過度造成假陰性。 ...
注意事項
1、選用活躍生長期菌種染色,老齡的革蘭氏陽性細菌會被染成紅色而造成假陰性。
2、塗片不宜過厚,以免脫色不完全造成假陽性。
3、脫色是革蘭氏染色是否成功的關鍵,脫色不夠造成假陽性,脫色過度造成假陰性。
實驗流程
1、取載玻片用紗布擦乾,載玻片的一面用馬克筆畫一個小圈(用來大致確 ...