1935年8月1日，中國共產黨又發表了《為抗日救國告全體同胞書》，再次明確表示只要國民黨軍隊停止進攻蘇區，實行對日作戰，紅軍願立刻與之攜手，共同救國。宣言建議一切願意參加抗日救國事業的黨派、團體、名流學者、政治家和地方軍政機關進行談判，共同籌組國防政府和抗日聯軍，並呼籲各黨派和軍隊首先停止內戰，以便集中一切國力去為抗日救國的神聖事業而奮鬥。1935年12月，中共中央在瓦窯堡召開政治局擴大會議。會議從理論和政策上正式確立了中國共產黨關於建立抗日民族統一戰線策略的總路線，提出“黨的任務就是把紅軍的活動和全國的工人、農民、學生、城市小資產階級、民族資產階級的一切活動匯合起來，成為一個統一的民族革命戰線”。1937年七七事變後不久，抗日民族統一戰線正式形成。
1937年9月，國民黨中央通訊社發表《中共中央為公佈國共合作宣言》，隨後蔣介石發表講話，實際上承認了中國共產黨的合法地位。由此，以國共兩黨第二次合作為基礎的抗日民族統一戰線正式建立。
抗日民族統一戰線形成的背景：１、日本帝國主義的野蠻侵略，使中華民族處於生死存亡的嚴重關頭，民族矛盾上升為主要矛盾。國民黨和共產黨是抗日民族統一戰線的核心，決定著統一戰線的發展。
２、中國共產黨顧全大局，以民族利益為重，毅然捐棄前嫌，倡導和推動第二次國共合作，最終促成了抗日民族統一戰線的建立，為抗日戰爭的勝利奠定了堅實的政治基礎。
抗日民族統一戰線形成的經過：１、1935年8月1日，中共駐共產國際代表團就以中華蘇維埃共和國臨時中央政府和中共中央的名義發表《為抗日救國告全國同胞書》，呼籲停止內戰，一致抗日。
２、1935年12月瓦窯堡會議全面地規定了黨在新的歷史條件下關於建立抗日民族統一戰線的策略方針。
３、1936年12月，西安事變爆發，在中共中央和周恩來主導下，以蔣介石接受“停止內戰，聯共抗日”的主張而和平解決。
４、1937年9月，國民黨中央通訊社發表《中共中央為公佈國共合作宣言》，隨後蔣介石發表講話，實際上承認了中國共產黨的合法地位。由此，以國共兩黨第二次合作為基礎的抗日民族統一戰線正式建立。
國共兩黨曾先後進行進兩次合作，兩次都以失敗告終，第一次是為了消滅封建軍閥打倒帝國主義，合作破裂的標誌是蔣介石在上海發動的四一二政變，它同時國民大革命的失敗。第二次合作是為了共同抵抗日本帝國主義的侵略，其間國民黨右派發動進多次針對中共的屠殺，但為了抗日統一戰線能夠進行下去，中共採取了有理有據抵抗的方針，所以統一戰線並沒有破裂，這種情況一直持續到抗戰勝利。
隨著日本的投降，國共兩黨的矛盾再次激化。1947年春，蔣介石限令中共撤消駐南京、上海、重慶等地的代表團，封閉重慶出版的《新華日報》，標誌著國共和談的大門被國民黨當局關閉，第二次國共合作徹底破裂。
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