1、江戶川柯南，外表看似小孩，其真實身份是高中生偵探——工藤新一。和青梅竹馬的同學毛利蘭一起去遊樂園玩，目擊到黑衣男子的可疑交易現場，被灌下開發中的藥物，變成了小學生的身體。那天以後，為了隱藏真實身份，化名江戶川柯南，在青梅竹馬的毛利蘭家寄住的同時，日復一日解決了許多案件。一切都是為了恢復自己的身體。
2、工藤新一，崇拜夏洛克·福爾摩斯的高中生偵探。5月4日出生，17歲。帝丹高中2年級B班。還是高中1年級學生的時候，在去往洛杉磯的飛機上解決了殺人案，在那裡和目暮警官等人相識。此後，作為高中生偵探活躍起來。特長是足球，頭腦清醒出眾。和青梅竹馬的小蘭一起去遊樂園（熱帶樂園）時，遇到了黑衣男子的交易現場，被組織灌下正在開發中的毒藥“APTX4869”，此後，就再也沒有訊息了。（被灌下毒藥後，變成了小學生的身體。）
3、毛利蘭，新一的青梅竹馬，帝丹高中2年級B班，空手道社團女主將，都大會中有頭號實力的文武雙全的女生。一直喜歡著新一，在他突然消失後等待著他的歸來。有時柯南的名推理會與新一的身影重疊，她開始像母親一般溫柔地照顧著柯南和少年偵探團。此外，和鈴木園子是青梅竹馬的摯友，從以前開始便無話不談。
4、毛利小五郎，小蘭的父親，前警視廳搜查一課刑警，與目暮警部是故交。現在在毛利偵探事務所營業，多虧了柯南的名推理，以“沉睡的小五郎”聞名。經過小蘭的拼命努力，經常與分居中的妻子——妃英理見面，有好色的一面妨礙著，很難坦率地重修舊好。
5、阿笠博士，住在新一隔壁的古怪發明家。知道柯南真實身份的少數人物之一。是發明了蝴蝶結型變聲器、腳力增強鞋、偵探徽章和足球射出腰帶等許多偵探產品的可靠人物，也照料著少年偵探團。在灰原哀逃離組織之後保護著她。
6、灰原哀，外表是小孩，但其實是黑衣組織的一員，新一被灌下的毒藥（APTX4869）的開發者，代號雪莉。姐姐被殺，背叛了組織，為了逃脫而服下了藥物，變成小學生的樣子。現在藏在阿笠博士家，和柯南一起在帝丹小學上學，另一邊研究著解藥。柯南是這世上唯一能與她分享相同境遇的物件。
7、吉田步美，少年偵探團的偶像存在。自稱“可愛的女偵探”，好奇心旺盛，但也是個愛哭鬼。另外，很喜歡柯南，她在灰原轉學之初，也曾含有醋意地問“你喜歡柯南嗎”，但現在是少年偵探團女成員，進行著團隊合作。
8、圓谷光彥，認真的頭腦派，有時也會解救柯南的危機……有協作性，是個紳士，有時也會守護步美和灰原。
9、小島元太，自稱少年偵探團團長。經常說錯話，有無人匹敵的強大正義感。有很大食量的吃貨，最喜歡鰻魚飯。
10、鈴木園子，小蘭的同學兼摯友。和工藤新一也是同學。鈴木財團的大小姐，喜歡流行的事物與品牌。好奇心強，跟小五郎很合得來，完全沒有大小姐架子。與京極真是戀人關係。
11、世良真純，轉學到小蘭班級的女高中生偵探。兩個哥哥中，大哥是赤井秀一，二哥是羽田秀吉。常用的摩托車是雅馬哈 XT400E Artesia。現在住在酒店。
12、京極真，綽號“蹴擊貴公子”。杯戶高中空手道社團主將，與園子是戀人關係。在外國進行武士修行，若園子出了什麼事，會棄賽回國。擁有傳統的價值觀念，是在園子穿露出肌膚的服裝或短裙時會進行提醒的性格。 [43]
13、羽田秀吉，曾經達成過七冠的職業棋手。現在是六冠王。戀人是警視廳交通部的宮本由美。
14、服部平次，關西高中生偵探。推理能力不在同齡的新一之下。父親服部平藏是大阪府警本部部長。這多虧了從小時候就混熟了的大瀧警官那裡，偷偷求教的調查情報的方法。此外，黝黑的皮膚是爺爺輩的隔代遺傳。知道柯南的身份是新一的少數人之一。與柯南一起解決了諸多疑難案件。據青梅竹馬的和葉等人說，平次和柯南在一起的樣子就如同兄弟一樣，柯南陷入危機的時候，平次也會特意從大阪趕來。
15、遠山和葉，平次青梅竹馬的女朋友。父親是大阪府警刑事部長。坦率體貼，擁有細膩的心。宣稱擔任平次姐姐的角色，其實發自內心喜歡平次。此外，兩個人在幼年玩的時候被手銬困住，其間是連洗澡上廁所也在一起的孽緣。當時的鎖的碎片，總是攜帶在和平次成雙成對的護身符裡，而這個護身符拯救了平次的危機。雖然曾經有一段時間誤解了小蘭和平次的關係，但現在和小蘭是非常要好的朋友！
16、怪盜基德，變裝達人。轟動世界的神出鬼沒的怪盜。因其國際犯罪者編號而被稱作怪盜1412號，總是會送上預告函，將警察玩弄於股掌之間，因偷盜成功的華麗伎倆，被世人稱作“怪盜基德”。實際上現在的基德是第二代，真實身份是高中生黑羽快鬥。他為了探求亡父的死因，繼承了怪盜基德的身份，尋找被稱作巨大寶石的珠寶。快斗的臉和新一一模一樣，以前，看到他的小蘭把他和新一搞混了。
17、妃英理，毛利小五郎的妻子，也是毛利蘭的母親。但從10年前起就在分居中。推理力、判斷力都無可挑剔的女律師。有“司法界的女王”的別稱。柯南對她有獨特的恐懼感，她對柯南的觀察力、推理力、知識量有正面的評價。擁有看穿真相的眼光，信念不隨感情而動搖。
18、工藤優作，新一的父親。世界知名推理小說家，擁有在新一以上的頭腦和推理力的唯一人物。新一至今仍未有超越優作的推理。頭腦清晰，也喜歡嚇新一一跳的惡作劇。
19、工藤有希子，新一的母親，前人氣女演員，和優作結婚的同時隱退。擔心獨自面對黑衣男子的新一的同時，偶爾也會回國以樂觀的形象出現在新一面前支援著他。
20、目暮十三，搜查一課強行犯三系的警部。也是小五郎刑警時期的上司。順帶一提，一直都帶著帽子，是為了隱藏過去案件中負的傷。
21、高木涉，警視廳搜查一課強行犯三系的刑警。目暮警部的部下。冒失的性格，有時會出現大失誤，也有時會被捲入案件核心。與在職場備受歡迎的佐藤刑警戀愛進行中，可總是被打攪。