求問引物合成的具體實驗步驟

　　引物合成的具體實驗步驟：

　　1、脫掉附加在CPG擔體上的第一個鹼基5羥基基團上的保護基，準備附加下一個新的鹼基；

　　2、活化新的鹼基單體，準備與第一個鹼基進行反應；

　　3、第二個鹼基與第一個鹼基發生偶聯反應；

　　4、將沒有反應的第一個鹼基的5羥基加帽封死，使其不再進一步參與反應；

　　5、將核苷亞磷酸酯氧化成更穩定的核苷磷酸酯。

　　6、重複進行第一步到第五步的迴圈，直至合成完所需的Oligo DNA序列。

　　7、合成結束後，將Oligo DNA分子從CPG上切下，再進行進一步的純化。

　　主料：麵粉。

　　輔料：鹽、酵母、溫水。

　　步驟：

　　1、適量酵母用溫水化開；

　　2、把化開的酵母慢慢倒入麵粉中，加入少許鹽；

　　3、把麵粉攪拌成絮狀；

　　4、揉成麵糰；

　　5、麵糰上蓋布放置半個小時；

　　6、麵糰取出後切成大小合適的麵糰；

　　7、把每個麵餅揉成圓形；

　　8、用擀麵杖壓扁；

　　9、依次做好所有面團；

　　10、加熱電餅鐺後把麵糰放入；

　　11、把麵餅兩面都煎至微黃即可。

　　在合成引物時，公司通常要求標註合成引物的濃度，通常用OD值表示，如1OD、2OD、5OD等。

　　OD值即光密度值，DNA採用紫外吸光譜法定量，一個OD值的定義為在260奈米波長下，1毫升體積水溶液，1釐米光程，吸光度為1安。合成引物時，為了確定引物濃度，可以在260奈米波長下測量吸光度，然後使用光吸收值和微摩消光係數的倒數，透過Beers法則計算出引物濃度。通常1個OD值的合成引物DNA的質量約為33微克。