質粒是小型環狀DNA分子,在基因工程中作為最常用,最簡單的載體。
質粒作為載體的條件有:
1、具有複製起始點。
2、具有兩種以上易被檢測的選擇性標記。
3、在選擇標記上具有多種限制酶的單一切點。
4、具有儘可能小的相對分子質量。
5、應屬於鬆弛複製型。
6、應為非傳遞性質粒理想值粒載體例子。
質粒可以作為遺傳工程的載體的原因簡述如下。
1、質粒能在宿主細胞中複製繁殖,且有較高的自主複製能力。
2、容易進入宿主細胞。
3、容易插入外來核酸片段,插入後不影響其進入宿主細胞和在細胞中的複製。
4、容易從宿主細胞中分離純化出來。
5、有容易被識別篩選的標誌。
不是所有的質粒都具有這五個特點,具體要根據宿主細胞進行分析和對質粒進行改造。
1、具有複製起點。沒有就意味著不能複製;
2、具有標記基因。沒有就意味著你不能識別哪些是轉化子;
3、具有多克隆位點。沒有就意味著沒法插入目的基因;
4、分子量小且複製數高。沒有就意味著難以操作;
5、容易檢測其表型。沒有就意味著不知道哪些是陽性克隆。
載體種類:質粒、噬菌體、腺病毒載體、逆轉錄病毒載體。
質粒特點: 存在於細菌染色體外的小型環狀DNA分子,具有自我複製功能,帶有抗性基因及表型識別等遺傳性標記物,經改造後具有多克隆位點。
質粒載體即,在由限制性核酸內切酶修飾過的質粒DNA序列中插入外源的目的基因,以質粒為載體,將目的基因透過轉化或 ...
1、取3mL菌液,8000g離心5min收集菌體;
2、加入200μL溶液I,充分震盪混勻;
3、加入400μL新配製的溶液II緩慢顛倒離心管數次以充分混勻,室溫放置5min;
4、加入300μL溶液III,混勻後,冰浴放置10min,期間搖動3次;
5、4˚C 10000g離心10min ...
質粒5個特點:質粒具有自我複製的能力。質粒DNA所編碼的基因產物賦予細菌某些性狀特徵。質粒可自行丟失與消除。質粒的轉移性。質粒可分為相容性與不相容性。質粒廣泛存在於生物界,從細菌、放線菌、絲狀真菌、大型真菌、酵母到植物,甚至人類機體中都含有。從分子組成看,有DNA質粒,也有RNA質粒; 從分子構型看,有線 ...
質粒是細菌、酵母菌和放線菌等生物中染色體或擬核以外的能夠自主複製的環狀DNA分子。
基本特徵:
1、存在於細胞質中的遺傳物質;
2、具有自主複製能力;
3、可傳給子代;
4、可在細菌之間轉移;
5、閉合環狀的雙鏈DNA分子。 ...
質粒廣泛存在於生物界,從細菌、放線菌、絲狀真菌、大型真菌、酵母到植物,甚至人類機體中都含有,從分子組成看,有DNA 質粒,也有RNA 質粒,從分子構型看,有線型質粒、也有環狀質粒,細菌質粒是基因工程中最常用的載體。
質粒是細菌、酵母菌和放線菌等生物中染色體或擬核以外的DNA分子,存在於細胞質中,具有自 ...
標記基因,原本是基因工程的專屬名詞,但是現在它已經成為一種基本的實驗工具,廣泛應用於分子生物學、細胞生物學、發育生物學等方面的研究。
標記基因是一種已知功能或已知序列的基因,能夠起著特異性標記的作用。在基因工程意義上來說,它是重組DNA載體的重要標記,通常用來檢驗轉化成功與否;在基因定位意義上來說,它 ...
因為透明質酸又名玻尿酸,透明質酸是皮膚的重要組成,能夠促進皮膚自我修復;人類皮膚成熟和老化過程也隨著透明質酸的含量和新陳代謝而變化。 ...