菌落總數的測定

　　方法：平板培養計數法。

　　材料：瓊脂培養基、食品檢樣、乙醇生理鹽水氫氧化鈉溶液 。

　　儀器：托盤天平、電爐、吸管、廣口瓶、三角瓶、玻璃珠、平皿、試管、試管架、酒精燈、均質器、乳缽、滅菌刀、剪刀、滅菌鑷子、酒精、棉球、玻璃、蠟筆。

　　實驗步驟：

　　1、將食品檢樣25克剪碎，放進225毫升滅菌生理鹽水，振搖做成1比10的均勻稀釋液；

　　2、 用1毫升滅菌吸管吸取1比10的均勻稀釋液1毫升，振搖試管混合均勻，做成1比100的稀釋液；

　　3、另取1毫升的滅菌吸管，按上項操作做成1比1000的稀釋液；

　　4、將10毫升釋液移入平皿，放入營養瓊脂培養基，轉動平皿混合均勻；

　　5、另一個營養瓊脂培養基加入10毫升水；

　　6、瓊脂凝固後，計算平皿內菌落數目，乘以稀釋倍數，即得1克樣品所含菌落總數。

　　根據對樣品汙染狀況的估計，選擇2個-3個適宜稀釋度的樣品勻液，在進行10倍遞增稀釋時，每個稀釋度分別吸取1ml樣品勻液加入兩個無菌平皿內，同時分別取1ml稀釋液加入兩個無菌平皿作空白對照。

　　菌落總數的測定，一般將被檢樣品製成幾個不同的10倍遞增稀釋液，從每個稀釋液中分別取出1毫升置於滅菌平皿中與營養瓊脂培養基混合，在一定溫度下，培養一定時間後，一般為48小時。記錄每個平皿中形成的菌落數量。依據稀釋倍數，計算出每克原始樣品中所含細菌菌落總數。

　　基本操作一般包括：樣品的稀釋、傾注平皿、培養48小時、計數報告。

　　國內外菌落總數測定方法基本一致，從檢樣處理、稀釋、傾注平皿到計數報告無何明顯不同，只是在某些具體要求方面稍有差別，如有的國家在樣品稀釋和傾注培養進，對吸管內液體的流速，稀釋液的振盪幅度、時間和次數以及放置時間等均作了比較具體的規定。