研究基因功能方法,簡介如下:
1、基因轉導技術:用物理的、化學的或生物學的方法將目的基因匯入受體細胞的一種技術。
2、反義核苷酸技術:透過鹼基互補原理,干擾基因的解旋、複製、轉錄、信使核糖核酸的剪接加工乃至輸出和翻譯等各個環節,從而調節細胞的生長、分化。
3、核酶技術:化學本質是核糖核酸, 具有酶的催化功能。核酶的作用底物可以是不同的分子, 作用底物是同一分子中的某些部位。
4、基因敲除和嵌入技術:指一種遺傳工程技術,針對某個序列已知但功能未知的序列,
研究基因功能方法,簡介如下:
1、基因轉導技術:用物理的、化學的或生物學的方法將目的基因匯入受體細胞的一種技術。
2、反義核苷酸技術:透過鹼基互補原理,干擾基因的解旋、複製、轉錄、信使核糖核酸的剪接加工乃至輸出和翻譯等各個環節,從而調節細胞的生長、分化。
3、核酶技術:化學本質是核糖核酸, 具有酶的催化功能。核酶的作用底物可以是不同的分子, 作用底物是同一分子中的某些部位。
4、基因敲除和嵌入技術:指一種遺傳工程技術,針對某個序列已知但功能未知的序列,
1、遺傳分析是傳統的研究基因功能的方法。透過表型來尋找引起功能異常的突變,但是尋找點突變無異於大海撈針,非常困難。
2、正向遺傳學方法,用物理方法或化學誘變劑造成的許多突變,透過表型來研究基因功能,該方法侷限在於涉及多點、多個基因的變化,而且很難確定是哪個基因在起作用。
3、反向遺傳學方法轉基因,技術出現在八十年代初,有效但是穩定性較差,效率並不高。
4、隨著現代分子生物學技術的不斷提高和小鼠胚胎幹細胞技術的成熟,八十年代末發展了革命性的基因打靶技術。基因打靶技術是一個從分子水平來研究基因功能的有效途徑,但是該技術需要對靶基因的結構和功能有相當深的瞭解,才能設計出可行的同源重組方案。
1、利用基因重組的技術進行基因敲除,根據目的基因序列設計合成出同源基因片段,利用基因打靶技術將攜帶同源基因片段的基因打靶載體,用電穿孔的技術匯入同源的胚胎幹細胞中,利用同源基因片段取代靶基因,達到基因敲除的目的。
2、篩選出基因打靶成功的細胞,用選擇性培養基篩選出基因打靶成功的細胞。
3、將打靶成功的細胞匯入小鼠體內,觀察表形。將打靶成功的細胞匯入小鼠囊胚中,再將囊胚匯入假孕小鼠體內,發育成為基因敲除的小鼠,觀察目的基因改變後的小鼠的生物學性狀改變,達到驗證目的基因功能的目的。