植物組織培養原理

　　植物組織培養原理：

　　植物組織培養即植物無菌培養技術，又稱離體培養，是根據植物細胞具有全能性的理論，利用植物體離體的器官(如根、莖、葉、莖尖、花、果實等）、組織（如形成層、表皮、皮層、髓部細胞、胚乳等）或細胞（如大孢子、小孢子、體細胞等）以及原生質體，在無菌和適宜的人工培養基及溫度等人工條件下，能誘匯出愈傷組織、不定芽、不定根，最後形成完整的植株的學科。

　　植物細胞的全能性是植物組織培養的原理。一個植物體的全部體細胞，都是從受精卵經過有絲分裂產生的。具有發育成完整個體所必需的全套遺傳物質，所以體細胞就具有形成完整植株的潛能，植物細胞的這種特性叫做全能性。

　　原理植物組織培養根據植物細胞具有全能性的理論，利用植物體離體的器官、組織或細胞以及原生質體，在無菌和適宜的人工培養基及溫度等人工條件下，能誘匯出愈傷組織、不定芽、不定根，最後形成完整的植株。

　　用植物各部分組織，如形成層、薄壁組織、葉肉組織、胚乳等進行培養獲得再生植株，也指在培養過程中從各器官上產生愈傷組織的培養，愈傷組織再經過再分化形成再生植物。

　　不過這種組織沒有發生分化，只是一團薄壁細胞，叫做愈傷組織。在適合的光照、溫度和一定的營養物質與激素等條件下，愈傷組織便開始分化。

　　1、將採來的植物材料除去不用的部分，將需要的部分仔細洗乾淨，如用適當的刷子等刷洗。把材料切割成適當大小，即滅菌容器能放入為宜。置自來水龍頭下流水沖洗幾分鐘至數小時，沖洗時間視材料清潔程度而宜。易漂浮或細小的材料，可裝入紗布袋內沖洗。流水沖洗在汙染嚴重時特別有用。洗時可加入洗衣粉清洗，然後再用自來水衝淨洗衣粉水。洗衣粉可除去輕度附著在植物表面的汙物，除去脂質性的物質，便於滅菌液的直接接觸。當然，最理想的清洗物質是表面活性物質—吐溫。

　　2、對材料的表面浸潤滅菌。要在超淨臺或接種箱內完成，準備好消毒的燒杯、玻璃棒、70%酒精、消毒液、無菌水、手錶等。用70%酒精浸10～30秒。由於酒精具有使植物材料表面被浸溼的作用，加之70%酒精穿透力強，也很易殺傷植物細胞，所以浸潤時間不能過長。有一些特殊的材料，如果實、花蕾、包有苞片、苞葉等的孕穗，多層鱗片的休眠芽等等，以及主要取用內部的材料，則可只用70%酒精處理稍長的時間。處理完的材料在無菌條件下，待酒精蒸發後再剝除外層，取用內部材料。

　　3、用滅菌劑處理。表面滅菌劑的種類較多，可根據情況選取1～2種使用見表。第四步是用無菌水涮洗，涮洗要每次3min左右，視採用的消毒液種類，涮洗3～10次左右。無菌水涮洗作用是免除消毒劑殺傷植物細胞的副作用注意：酒精滲透性強，幼嫩材料易在酒精中失綠，所以浸泡時間要短，防止酒精殺死植物細胞。老熟材料，特別是種子等可以在酒精中浸泡時間長一些，如種子可以浸泡5分鐘。昇汞的滲透力弱，一般浸泡10分鐘左右，對植物材料的殺傷力不大。漂白粉容易導致植物材料失綠，所以對於幼嫩材料要慎用。在消毒液中加入濃度為0.08～0.12%的吐溫20或80（一種溼潤劑），可以降低植物材料表面的張力，達到更好的消毒效果。