植物組織培養難的原因:由於不同品種植物的生長環境和性質不同,對不同植物培養基配方配合它的生長需要不同,以及溫度光線的管理不同等使植物組織培養難度加大。
植物組織培養從植物體分離出符合需要的組織、器官或細胞,原生質體等,透過無菌操作,在無菌條件下接種在含有各種營養物質及植物激素的培養基上進行培養以獲得再生的完整植株或生產具有經濟價值的其他產品的技術。
植物組織培養是在一定的場所和環境下,人為提供一定的溫度、光照、溼度、營養、激素等條件,極利於高度集約化和高密度工廠化生產,也利於
植物組織培養難的原因:由於不同品種植物的生長環境和性質不同,對不同植物培養基配方配合它的生長需要不同,以及溫度光線的管理不同等使植物組織培養難度加大。
植物組織培養從植物體分離出符合需要的組織、器官或細胞,原生質體等,透過無菌操作,在無菌條件下接種在含有各種營養物質及植物激素的培養基上進行培養以獲得再生的完整植株或生產具有經濟價值的其他產品的技術。
植物組織培養是在一定的場所和環境下,人為提供一定的溫度、光照、溼度、營養、激素等條件,極利於高度集約化和高密度工廠化生產,也利於
植物細胞的全能性是植物組織培養的原理。一個植物體的全部體細胞,都是從受精卵經過有絲分裂產生的。具有發育成完整個體所必需的全套遺傳物質,所以體細胞就具有形成完整植株的潛能,植物細胞的這種特性叫做全能性。
原理植物組織培養根據植物細胞具有全能性的理論,利用植物體離體的器官、組織或細胞以及原生質體,在無菌和適宜的人工培養基及溫度等人工條件下,能誘匯出愈傷組織、不定芽、不定根,最後形成完整的植株。
用植物各部分組織,如形成層、薄壁組織、葉肉組織、胚乳等進行培養獲得再生植株,也指在培養過程中從各器官上產生愈傷組織的培養,愈傷組織再經過再分化形成再生植物。
不過這種組織沒有發生分化,只是一團薄壁細胞,叫做愈傷組織。在適合的光照、溫度和一定的營養物質與激素等條件下,愈傷組織便開始分化。
1、將採來的植物材料除去不用的部分,將需要的部分仔細洗乾淨,如用適當的刷子等刷洗。把材料切割成適當大小,即滅菌容器能放入為宜。置自來水龍頭下流水沖洗幾分鐘至數小時,沖洗時間視材料清潔程度而宜。易漂浮或細小的材料,可裝入紗布袋內沖洗。流水沖洗在汙染嚴重時特別有用。洗時可加入洗衣粉清洗,然後再用自來水衝淨洗衣粉水。洗衣粉可除去輕度附著在植物表面的汙物,除去脂質性的物質,便於滅菌液的直接接觸。當然,最理想的清洗物質是表面活性物質—吐溫。
2、對材料的表面浸潤滅菌。要在超淨臺或接種箱內完成,準備好消毒的燒杯、玻璃棒、70%酒精、消毒液、無菌水、手錶等。用70%酒精浸10~30秒。由於酒精具有使植物材料表面被浸溼的作用,加之70%酒精穿透力強,也很易殺傷植物細胞,所以浸潤時間不能過長。有一些特殊的材料,如果實、花蕾、包有苞片、苞葉等的孕穗,多層鱗片的休眠芽等等,以及主要取用內部的材料,則可只用70%酒精處理稍長的時間。處理完的材料在無菌條件下,待酒精蒸發後再剝除外層,取用內部材料。
3、用滅菌劑處理。表面滅菌劑的種類較多,可根據情況選取1~2種使用見表。第四步是用無菌水涮洗,涮洗要每次3min左右,視採用的消毒液種類,涮洗3~10次左右。無菌水涮洗作用是免除消毒劑殺傷植物細胞的副作用注意:酒精滲透性強,幼嫩材料易在酒精中失綠,所以浸泡時間要短,防止酒精殺死植物細胞。老熟材料,特別是種子等可以在酒精中浸泡時間長一些,如種子可以浸泡5分鐘。昇汞的滲透力弱,一般浸泡10分鐘左右,對植物材料的殺傷力不大。漂白粉容易導致植物材料失綠,所以對於幼嫩材料要慎用。在消毒液中加入濃度為0.08~0.12%的吐溫20或80(一種溼潤劑),可以降低植物材料表面的張力,達到更好的消毒效果。