因為在你的檢測波長中有負吸收的物質,所以會出倒峰,用水做溶劑是會有倒峰,多用有機相洗柱子再看看。
1:你用的溶劑出峰了,但保留時間一般很小2:你的色譜系統個元器件之間的資料線正負極接反。
1、高效液相色譜法的原理是以液體為流動相,採用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩衝液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離後,進入檢測器進行檢測。
2、高效液相色譜法有“四高一廣”的特點:
(1)高壓:流動相為液體,流經色譜柱時,受到的阻力較大,為了能迅速透過色譜柱,必須對載液加高壓。
(2)高速:分析速度快、載液流速快,較經典液體色譜法速度快得多,通常分析一個樣品在15~30分鐘,有些樣品甚至在5分鐘內即可完成,一般小於1小時。
(3)高效:分離效能高。可選擇固定相和流動相以達到最佳分離效果,比工業精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。
(4)高靈敏度:紫外檢測器可達0。01ng,進樣量在μL數量級。
(5)應用範圍廣:百分之七十以上的有機化合物可用高效液相色譜分析,特別是高沸點、大分子、強極性、熱穩定性差化合物的分離分析,顯示出優勢。
正相色譜法:根據流動相和固定相相對極性不同,液相色譜分為正相色譜和反相色譜。固定相極性大於流動相極性的情況,稱為正相色譜。矽膠色譜和極性鍵合相色譜可作正相色譜。
正相色譜是採用極性固定相、非極性流動相的分離方法。這是一種根據分子的極性大小將其分開的液相色譜技術,因為正相色譜以吸附效應作為分離的基礎,所以也稱為吸附色譜。在正相色譜中,樣品分子與載體基質的矽醇基團發生特異的極性相互作用,與固定相產生強極性相互作用的極性樣品分子比較難被洗脫,在柱內停留比較長的時間,反之,極性較弱或非極性分子與
荷蘭學者範第姆特等人吸收塔板理論中的一些概念,並進一步把色譜分配過程與分子擴散和氣液兩相中的傳質過程聯絡起來,建立了色譜過程的動力學理論,即速率理論。速率理論認為,單個組分分子在色譜柱內固定相和流動相間要發生千萬次轉移,加上分子擴散和運動途徑等因素,它在柱內的運動是高度不規則的,是隨機的,在柱中隨流動相前 ...
在反相液相色譜中,固定相的極性小於流動相,洗脫順序取決於溶質分子的疏水性,疏水性強的保留時間長。
反相高效液相色譜是由非極性固定相和極性流動相所組成的液相色譜體系,它正好與由極性固定相和弱極性流動相所組成的液相色譜體系相反。RP-HPLC的典型的固定相是十八烷基鍵合矽膠,典型的流動相是甲醇和乙腈。RP ...
高效液相色譜更適宜於分離、分析高沸點、熱穩定性差、有生理活性及相對分子量比較大的物質,因而廣泛應用於核酸、肽類、內酯、稠環芳烴、高聚物、藥物、人體代謝產物、表面活性劑,抗氧化劑、殺蟲劑、除莠劑的分析等物質的分析. ...
檢出限是指產生一個能可靠地被檢出的分析訊號所需要的某元素的最小濃度或含量,而測定限則是指定量分析實際可以達到的極限。檢出限的求法:1、求出相應於3至5倍儀器信噪比的濃度值;2、 將分析物配在空白水中,用儀器重複測定值標準偏差的3倍所對應的濃度值;3、求出標準曲線在低濃度端的折點。因為當元素在試樣中的含量相 ...
1、凝膠色譜法又稱為凝膠過濾法、 凝膠層析、凝膠滲透層析、通透層析、分子篩層析。
2、凝膠色譜技術是六十年代初發展起來的一種快速而又簡單的分離分技術,由於裝置簡單、操作方便,不需要有機溶劑,對高分子物質有很高的分離效果。目前已經被生物化學、分子生物學、生物工程學、分子免疫學以及醫學等有關領域廣泛採用, ...
薄層色譜法,系將適宜的固定相塗布於玻璃板、塑膠或鋁基片上,成一均勻薄層。待點樣、展開後,根據比移值與適宜的對照物按同法所得的色譜圖的比移值作對比,用以進行藥品的鑑別、雜質檢查或含量測定的方法。薄層色譜法是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術,也用於跟蹤反應程序。 ...
色譜法基本原理是指在填充色譜柱中,當組分隨流動相向柱出口遷移時,流動相由於受到固定相顆粒障礙,不斷改變流動方向,使組分分子在前進中形成紊亂的類似渦流的流動,故稱渦流擴散。
1、渦流擴散項 :在填充色譜柱中,當組分隨流動相向柱出口遷移時,流動相由於受到固定相顆粒障礙,不斷改變流動方向,使組分分子在前進中 ...