什麼是色譜分離

　　色譜分離是基於不同物質在由固定相和流動相構成的體系中具有不同的分配係數，在採用流動相洗脫過程中呈現不同保留時間，從而實現分離。

　　傳統色譜分離採用固定的色譜塔進行，先進入一定量物料，然後用洗脫劑不斷洗脫，在同一出口在不同時間段就可接到不同的產品組分，此過程費時費力。現代色譜分離經過改進，將固定相的樹脂做成可以連續流動的系統，利用物質與固定相的相對運動速度不同實現分離。

　　色譜分離基於各組分在兩相之間平衡分配的差異。

　　以吸附色譜為例：

　　吸附到解吸到再吸附到再解吸到反覆多次洗脫到被測組分分配係數不同到差速遷移到分離分配係數的微小差異到吸附能力的微小差異微小差異積累到較大差異到吸附能力弱的組分先流出；吸附能力強的組分後流出。

　　色譜過程的本質是待分離物質分子在固定相和流動相之間分配平衡的過程，不同的物質在兩相之間的分配會不同，這使其隨流動相運動速度各不相同，隨著流動相的運動，混合物中的不同組分在固定相上相互分離。

　　凝膠色譜法是根據相對分子質量的大小分離蛋白質。

　　大分子物質由於直徑較大，不易進入凝膠顆粒的微孔，而只能分佈顆粒之間，所以在洗脫時向下移動的速度較快。小分子物質除了可在凝膠顆粒間隙中擴散外，還可以進入凝膠顆粒的微孔中，即進入凝膠相內，在向下移動的過程中，從一個凝膠內擴散到顆粒間隙後再進入另一凝膠顆粒，如此不斷地進入和擴散，小分子物質的下移速度落後於大分子物質，從而使樣品中分子大的先流出色譜柱，中等分子的後流出，分子最小的最後流出。