優點:分離效率高,分析速度快,檢驗靈敏度高,樣品用量少,選擇性好,多組分同時分析,易於自動化。缺點:定效能力較差。
色譜分離法:在工業上應用色譜分析原理分離性質近似組分的方法。使溶液分批透過垂直的填充吸附劑固定床,將各種組分分離精製。色譜柱內的填充吸附劑是多孔的惰性固體,用非揮發性的惰性液體塗漬。被分離溶液的溶質與惰性液體有大小不同的溶解度。如果被吸附的物質是氣體,發生“吸收”現象。如果被吸附的物質是液體,發生“萃取”現象。分離係數取數聚決於分配係數的大小。
優點:分離效率高,分析速度快,檢驗靈敏度高,樣品用量少,選擇性好,多組分同時分析,易於自動化。缺點:定效能力較差。
色譜分離法:在工業上應用色譜分析原理分離性質近似組分的方法。使溶液分批透過垂直的填充吸附劑固定床,將各種組分分離精製。色譜柱內的填充吸附劑是多孔的惰性固體,用非揮發性的惰性液體塗漬。被分離溶液的溶質與惰性液體有大小不同的溶解度。如果被吸附的物質是氣體,發生“吸收”現象。如果被吸附的物質是液體,發生“萃取”現象。分離係數取數聚決於分配係數的大小。
凝膠色譜法是根據相對分子質量的大小分離蛋白質。
大分子物質由於直徑較大,不易進入凝膠顆粒的微孔,而只能分佈顆粒之間,所以在洗脫時向下移動的速度較快。小分子物質除了可在凝膠顆粒間隙中擴散外,還可以進入凝膠顆粒的微孔中,即進入凝膠相內,在向下移動的過程中,從一個凝膠內擴散到顆粒間隙後再進入另一凝膠顆粒,如此不斷地進入和擴散,小分子物質的下移速度落後於大分子物質,從而使樣品中分子大的先流出色譜柱,中等分子的後流出,分子最小的最後流出。
光譜法與色譜法分析原理不同之處為:
1、光譜和色譜是分析方法的兩個大類,其中都包含很多小類;
2、光譜是利用物質對光的吸收或者本身受到激發而得到特定光譜來進行分析的,根據光譜的性質可分為1分子光譜,由原子間鍵能變化所致,包括紫外可見光譜、紅外光譜,分子熒光光譜;
3、原子光譜,原子外層電子能級變化所致,包括原子吸收光譜,原子發射光譜,原子熒光光譜;
4、原子內層電子能級變化所致,x射線熒光光譜色譜其實是一種分離方法,目的是將混合物分離為各種純物質,然後再用光譜、質譜等方法進行分別檢測,分為液相色譜、氣相色譜、凝膠色譜等;
5、檢測器可使用1液相色譜:紫外可見、示差折光、熒光、質譜、蒸發光散射等;
6、氣相色譜:氫火焰離子、熱導檢測器、質譜等;
7、凝膠色譜:示差折光、鐳射光散射等。