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色譜法的原理

高效液相色譜法原理

  1、高效液相色譜法的原理是以液體為流動相,採用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩衝液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離後,進入檢測器進行檢測。

  2、高效液相色譜法有“四高一廣”的特點:

  (1)高壓:流動相為液體,流經色譜柱時,受到的阻力較大,為了能迅速透過色譜柱,必須對載液加高壓。

  (2)高速:分析速度快、載液流速快,較經典液體色譜法速度快得多,通常分析一個樣品在15~30分鐘,有些樣品甚至在5分鐘內即可完成,一般小於1小時。

  (3)高效:分離效能高。可選擇固定相和流動相以達到最佳分離效果,比工業精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。

  (4)高靈敏度:紫外檢測器可達0。01ng,進樣量在μL數量級。

  (5)應用範圍廣:百分之七十以上的有機化合物可用高效液相色譜分析,特別是高沸點、大分子、強極性、熱穩定性差化合物的分離分析,顯示出優勢。

離子色譜法的原理

  離子色譜的工作原理:離子交換平衡離子色譜中使用的固定相是離子交換樹脂,離子交換樹脂上分佈有固定的帶電荷的基團和能遊動的配位離子。當樣品加入離子交換色譜往後,如果用適當的溶液洗脫,樣品離子即與樹脂上能遊動的離子進行交 換,並且連續進行可逆交換吸附和解吸,最後達到吸附平衡。

  離子色譜法是利用離子交換原理,連續對共存的多種陰離子或陽離子進行分離、定性和定量的方法。分析陽離子時,分離柱填充低容量的陽離子交換樹脂,用鹽酸溶液做淋洗液。

離子交換色譜法的原理裝置及應用

  原理:離子交換色譜以離子交換樹脂作為固定相,樹脂上具有固定離子基團及可交換的離子基團。當流動相帶著組分電離生成的離子透過固定相時,組分離子與樹脂上可交換的離子基團進行可逆變換。根據組分離子對樹脂親合力不同而得到分離。

  應用: 離子色譜主要用於測定各種離子的含量,特別適於測定水溶液中低濃度的陰離子,例如飲用水水質分析,高純水的離子分析,礦泉水,雨水,各種廢水和電廠水的分析,紙漿和漂白液的分析,食品分析,生物體液尿和血等中的離子測定,以及鋼鐵工業,環境保護等方面的應用。離子色譜能測定下列型別的離子:有機陰離子,鹼金屬,鹼土金屬,重金屬,稀土離子和有機酸,以及胺和銨鹽等。

  裝置:分離柱,抑制柱和柱後衍生作用,檢測器。


原理分類

  分為三類:柱色譜、紙色譜以及薄層色譜   1、柱色譜為向玻璃管中填入固定相,以流動相溶劑浸潤後在上方倒入待分離的溶液,再滴加流動相,因為待分離物質對固定相的吸附力不同,吸附力大的固著不動或移動緩慢,吸附力小的被流動相溶劑洗下來隨流動相向下流動,從而實現分離;   2、紙色譜以濾紙條為固定相,在紙條上點上待 ...

原理

  色譜法的原理是待分離物質分子在固定相和流動相之間分配平衡的過程,不同的物質在兩相之間的分配會不同,這使其隨流動相運動速度各不相同,隨著流動相的運動,混合物中的不同組分在固定相上相互分離。   根據物質的分離機制,又可以分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、凝膠色譜、親和色譜等類別。 ...

光譜分析原理有何不同

  光譜法與色譜法分析原理不同之處為:   1、光譜和色譜是分析方法的兩個大類,其中都包含很多小類;   2、光譜是利用物質對光的吸收或者本身受到激發而得到特定光譜來進行分析的,根據光譜的性質可分為1分子光譜,由原子間鍵能變化所致,包括紫外可見光譜、紅外光譜,分子熒光光譜;   3、原子光譜,原子外層電子能級 ...

簡述的四種原理機制

  1、固色譜:不同物質的吸附能力不同而分離;   2液色譜:溶解(分配)能力不同而分離;   3、離子交換色譜:離子置換能力不同而分離;   4、空間排阻色譜:色譜填料顆粒具有一定孔徑,待分離物質中的大分子顆粒直徑大於孔徑,先出峰,小分子顆粒直徑小於孔徑,就會進入填料顆粒的空隙裡,停留時間長,後出峰。 ...

薄層原理

  薄層色譜法的原理:薄層色譜法利用各成分對同一吸附劑吸附能力不同,使在流動相(溶劑)流過固定相(吸附劑)的過程中,連續的產生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,從而達到各成分的互相分離的目的。   薄層色譜法(TLC)系將適宜的固定相塗布於玻璃板、塑膠或鋁基片上,成一均勻薄層。待點樣、展開後,根據比移值(Rf) ...

凝膠介紹

  1、凝膠色譜法又稱為凝膠過濾法、 凝膠層析、凝膠滲透層析、通透層析、分子篩層析。   2、凝膠色譜技術是六十年代初發展起來的一種快速而又簡單的分離分技術,由於裝置簡單、操作方便,不需要有機溶劑,對高分子物質有很高的分離效果。目前已經被生物化學、分子生物學、生物工程學、分子免疫學以及醫學等有關領域廣泛採用, ...

高效液相為什麼總出倒峰

  因為在你的檢測波長中有負吸收的物質,所以會出倒峰,用水做溶劑是會有倒峰,多用有機相洗柱子再看看。   1:你用的溶劑出峰了,但保留時間一般很小2:你的色譜系統個元器件之間的資料線正負極接反。 ...