1、培養料的種類 蘑菇的培養料主要有糞草培養料、合成培養料和半合成培養料三種。應用最普遍的是糞草培養料。其基本的原料有下列幾種：
①秸稈類 稻草、麥稈是栽培蘑菇的主要原料。此外，玉米稈、甘蔗渣、油菜殼和豆科作物的莖稈等都可作為堆制培養料的原材料，但要足乾和無黴爛，已經變質的不能採用。稻草以糯稻草和雜交水稻草為最好，常規稻的晚稻草其次，早稻草質量較差。大麥杆和稻草養分充足，腐熟容易。小麥稈、甘蔗渣質硬，不易腐熟，但通氣性好。堆料時通常將稻草和麥稈混合使用的培養料比使用單一草料的質量較好。加以稻草和小麥稈混合使用，應先把小麥稈和糞肥先堆一星期後，再堆稻草。
②糞肥 主要為馬、牛、豬的糞便及人糞尿等。馬糞有機質豐富，質地疏鬆，富有彈性，保溫、保水效能好。堆料時發效快，溫度高，腐熟性好，是栽培蘑菇的好材料，但來源不多。目前廣泛應用的是來源比較充足的豬、牛糞。豬糞性冷，含氮量較高，牛糞性熱，含氮量較低，兩者混合使用，可以互相彌補，使培養料養分足，肥效長。牛糞質粘，溼糞堆料，形成糞塊，不易打散，故宜曬乾敲碎後使用。目前由於蘑菇栽培面積不斷擴大，豬、牛糞也供不應求，以人糞尿來代替部分豬、牛糞已有應用，並收到良好的效果。此外，羊、兔、雞、鴨等的糞便， 都可用來堆制培養料栽培蘑菇。
③新增料 堆料中常加部分餅肥、尿素、硫酸銨、過磷酸鈣、石灰、石膏等，以增加培養料的養分和改善培養料的理化性質，如調節酸鹼度，防止培養料發粘和氮素損失，以及消毒殺菌作用（如石灰）。
2、 培養料的配方 培養料的配方是根據蘑菇生長髮育對養分的要求（包括一定的碳氮比），進行合理搭配的成分。常用的培養料配比有以下幾種：
①糞草培養料 是以稻草、麥稈和糞肥為主要材料，附加少量的新增料堆制而成的。糞草的比例有6：4、5：5和4：6 等不一。一般每一百平方米的栽培面積，需要糞草乾重3,500～4,500公斤，可參照表8的配比進行備料。
②半合成培養料 主要是增加草料，減少糞料，適當增 加些新增料堆制而成。
③合成培養料 只有稻稈類和新增料為原料，不用糞肥。
3、培養料的堆制和發酵 用於栽培蘑菇的培養料是先透過糞草的堆制和各類微生物共同參與活動的結果，所以培養料的堆制過程也就是發酵的過程。堆料一開始，各類微生物的消長就有秩序的進行著。先是一些中溫性的微生物如細菌、藻狀菌等的活動，它們適應的溫度範圍在20～38℃利用 堆料中簡單的有機物，分解果膠質等（不分解纖維素），並放出大量的熱能，使溫度逐漸升高，這種熱稱為生物熱。
當溫度升到40～50℃時，一些耐溫性微生物如腐植黴等真菌，開始活動；它們能分解堆料中的纖維素和木質素。當溫度繼續升高到50～60℃時，一些嗜熱性微生物；主要是嗜熱放線菌包括鏈黴菌、嗜熱單孢菌和無芽孢的假單孢桿菌等進行活動，它們也分解纖維素和木質素，利用了堆料中游離的糖分和固定了遊離氨，同時所產生的抗菌素有抑制其它雜菌生長的作用。所以培養料經過堆制和發酵可以達到以下兩個目的：一是創造一個適於蘑菇生長而不適於其他雜菌生長的環境。即無害化的培養料；二是由嗜熱放線菌所產生的多糖類、微生物蛋白（氨基酸）、維生素（硫臉素、煙酸等）及生物激素等，可供蘑菇直接利用或刺激蘑菇菌絲的生長。
①堆料時間和方法 培養料的堆制一般是在當地適宜播種期前一個月進行。具體做法是在堆料前一天，將稻草（或麥稈）用水浸泡，牛糞敲碎用尿水調溼，先在地面上鋪一層寬2米，厚20釐米，其長度不限的草料，然後鋪上一層5～6釐米厚的糞肥，糞草都要鋪平，這樣一層草一層糞，依次堆積，直至堆高1.5米為止。堆的四周上下基本垂直或略成梯形，堆頂成龜背形。堆料時，要邊堆邊分層適當澆水，水要澆在草上。堆後於頂部蓋上草或塑膠薄膜，以防雨淋日曬，養分散失。一般在堆後次日，堆基四周會有少量水分流出。
②翻堆 翻堆的目的是可使培養料發酵均勻，散除堆中臭氣，並結合調節水分。通常翻堆4～5次。
第一次翻堆是在堆料後6～7天、當溫度高達70～80℃， 開始下降時即可進行。翻堆時要將下面的糞草翻到上面，四周的翻到中間，並充分抖松拌和。新增料中的氮肥如硫酸銨、人糞尿、尿素等應在堆料或第一次翻堆時加入，以供堆料中的微生物利用。如新增太遲，微生物利用不完全，進料時，遊離態氨太濃，不利蘑菇菌絲生長。過磷酸鈣於第一次翻堆時加入，對促進微生物活動和固定氮素也是十分有益的。第一次翻堆要澆足水，一般以用手緊握糞草指間能滴出6～7滴水為宜。第二次翻堆是在第一次翻堆後的5～6天進行。這次翻堆要均勻加入石膏粉以調節培養料的理化性，促進微生物活動和增加硫、鈣等成分。當第二次翻堆時，糞草已初步腐熟，容易吸水，加水時不宜過多，以防培養料變黑、發臭和堆溫不高。溼度以手緊握培養料能滴出2-3滴水為宜。
以後隔4～5天、3～4天翻第三次、第四次以至第五次。 每次翻堆相隔時間掌握由長而短，依次遞減。水分的調節控制先溼後幹，最後一次翻堆，培養料適宜的含水量為65％，即以手握緊培養料，指縫間有水滴而又滴不下為宜。並要求在最後一兩次翻堆時調節好。在最後一次翻堆時每百平方米栽培面積的培養料中加入1.5公斤福爾馬林和0.25公斤敵敵畏，用塑膠薄膜蓋嚴以殺滅堆料中的雜菌和害蟲。