質粒轉化是指將外源質粒匯入原核細胞的過程。其中的轉化是指將外源的脫氧核糖核酸分子引入受體細胞,使之獲得新的遺傳性狀的一種手段。
將質粒脫氧核糖核酸匯入細菌的過程稱為轉化。此感受態細菌細胞在氯化鈣低滲溶液中膨脹為球狀。質粒脫氧核糖核酸與氯化鈣形成抗磷酸鈣複合物黏附於細菌表面，經42攝氏度短時間的熱衝擊處理，促進細胞吸收脫氧核糖核酸複合物。在豐富培養基上生長數小時後，球狀細胞復原並分裂增殖。被轉化的細菌中，外源基因得到表達。在選擇性培養平板上，可選出所需的轉化子。
1、具有複製起點。沒有就意味著不能複製；
2、具有標記基因。沒有就意味著你不能識別哪些是轉化子；
3、具有多克隆位點。沒有就意味著沒法插入目的基因；
4、分子量小且複製數高。沒有就意味著難以操作；
5、容易檢測其表型。沒有就意味著不知道哪些是陽性克隆。
質粒是小型環狀DNA分子，在基因工程中作為最常用，最簡單的載體。
質粒作為載體的條件有：
1、具有複製起始點。
2、具有兩種以上易被檢測的選擇性標記。
3、在選擇標記上具有多種限制酶的單一切點。
4、具有儘可能小的相對分子質量。
5、應屬於鬆弛複製型。
6、應為非傳遞性質粒理想值粒載體例子。
質粒可以作為遺傳工程的載體的原因簡述如下。
1、質粒能在宿主細胞中複製繁殖，且有較高的自主複製能力。
2、容易進入宿主細胞。
3、容易插入外來核酸片段，插入後不影響其進入宿主細胞和在細胞中的複製。
4、容易從宿主細胞中分離純化出來。
5、有容易被識別篩選的標誌。
不是所有的質粒都具 ...
1、取3mL菌液，8000g離心5min收集菌體；
2、加入200μL溶液I，充分震盪混勻；
3、加入400μL新配製的溶液II緩慢顛倒離心管數次以充分混勻，室溫放置5min；
4、加入300μL溶液III，混勻後，冰浴放置10min，期間搖動3次；
5、4˚C 10000g離心10min ...
質粒5個特點：質粒具有自我複製的能力。質粒ＤＮＡ所編碼的基因產物賦予細菌某些性狀特徵。質粒可自行丟失與消除。質粒的轉移性。質粒可分為相容性與不相容性。質粒廣泛存在於生物界，從細菌、放線菌、絲狀真菌、大型真菌、酵母到植物，甚至人類機體中都含有。從分子組成看，有ＤＮＡ質粒，也有ＲＮＡ質粒； 從分子構型看，有線 ...
質粒是細菌、酵母菌和放線菌等生物中染色體或擬核以外的能夠自主複製的環狀DNA分子。
基本特徵：
1、存在於細胞質中的遺傳物質；
2、具有自主複製能力；
3、可傳給子代；
4、可在細菌之間轉移；
5、閉合環狀的雙鏈DNA分子。 ...
質粒廣泛存在於生物界，從細菌、放線菌、絲狀真菌、大型真菌、酵母到植物，甚至人類機體中都含有，從分子組成看，有DNA 質粒，也有RNA 質粒，從分子構型看，有線型質粒、也有環狀質粒，細菌質粒是基因工程中最常用的載體。
質粒是細菌、酵母菌和放線菌等生物中染色體或擬核以外的DNA分子，存在於細胞質中，具有自 ...
標記基因，原本是基因工程的專屬名詞，但是現在它已經成為一種基本的實驗工具，廣泛應用於分子生物學、細胞生物學、發育生物學等方面的研究。
標記基因是一種已知功能或已知序列的基因，能夠起著特異性標記的作用。在基因工程意義上來說，它是重組DNA載體的重要標記，通常用來檢驗轉化成功與否；在基因定位意義上來說，它 ...
原理：將細菌懸浮於含有和能消化細胞壁的溶菌酶的緩衝液中，然後加熱到使其裂解。加熱除了破壞細菌外壁，還有助於解開DNA鏈的鹼基配對，並使蛋白質和染色體DNA變性。
特徵：蛋白質的去除，主要是靠不溶解的蛋白質複合物的形成。雖然將中和後的體系置於一段時間，可以形成更多的該不溶複合物，從而使蛋白質殘留更少，但 ...